RACE技術(shù)-漩渦振蕩器技術(shù)文章

更新時(shí)間：2013-12-10 點(diǎn)擊次數(shù)：5274次

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RACE（rapid-amplification ofcDNA ends）是通過(guò)PCR進(jìn)行cDNA末端快速克隆的技術(shù),

通過(guò)PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)的，無(wú)須建立cDNA文庫(kù)，可以在很短的時(shí)間內(nèi)獲得有利用價(jià)值的

信息.一般分5-和3-RACE兩種.3-RACE較簡(jiǎn)單,首先將mRNA或總RNA 用PolyT引物反轉(zhuǎn)

錄,根據(jù)一般基因具有polyA尾巴的特點(diǎn),選用特異引物（根據(jù)已知序列設(shè)計(jì)）和PolyT引物

PCR即可.大多實(shí)驗(yàn)者反映一次PCR可以搞定.5-RACE相對(duì)較難,目前流行幾種5-RACE.

其一為加接頭（傳統(tǒng)）,根據(jù)接頭引物和自己設(shè)計(jì)特異引物PCR,可以設(shè)計(jì)巢式PCR二次擴(kuò)

增.另外,有利用反向PCR技術(shù),連接成環(huán)在PCR.還有,GENE公司一種smart RACE PCR,利

用反轉(zhuǎn)酶末斷加C特點(diǎn),直接加上多G接頭,轉(zhuǎn)換模板而無(wú)需用連接酶加接頭.

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